宋海波：如何正确看待新冠抗原检测中出现的假阳性问题 ！2022年3月11日，国务院应对新冠肺炎疫情联防联控机制综合组印发《新冠病毒抗原检测应用方案（试行）》，在核酸检测基础上，增加抗原检测作为补充。

相较于核酸检测，抗原检测具有无需专业人员、场地及仪器、出结果速度快等优点。在特异性、灵敏度方面虽然受方法学的影响较核酸检测有一定的差距，但作为粗筛有着其简便、快速、多场景应用的优点，因此新冠抗原检测作为防疫工作的重要补充，有着有利于提高“早发现，早预警”的自我监测的重要作用。

新冠抗原试剂的检测原理是抗原抗体的特异性结合反应，通俗地说就是依赖于针对抗体与待测新冠抗原的特异性结合，特异性结合类似于钥匙和锁的关系一样，一把锁只有专门配套的钥匙才能打开，别的钥匙打不开这把锁，具有配套和对应性，理论上说只有样本中存在待测靶向物质抗原才能与检测试剂中包被的抗体进行特异性结合，在T线位置产生显色。但新冠抗原和所有免疫方法学检测试剂一样，其试剂本身也会存在着一定概率的假阳性或假阴性的非特异性结合问题，好似于一把钥匙可以打开好几把锁或者一个锁可以被好几款钥匙打开一样。由于方法学本身属性的局限，因此影响因素众多，而非特异性问题是所有免疫检测中不可避免的常见现象，因此新冠抗原检测出现假阳性或假阴性是客观存在的也是不可避免的。

常见的引起新冠抗原检测假阳性的原因有以下几个方面：

1.内、外源性的干扰物质是引起连续测试假阳性的常见原因，鼻腔标本的成分比较复杂，含有粘蛋白、粘膜表面抗体、分泌型抗体、补体、盐类、水份等多种物质，另外在有其他的微生物感染时，或者是个人自身特质，服用某些药物或者特殊食物时，标本中就可能存在导致免疫测定假阳性的内源性或外源性干扰物质，这些物质都有可能产生非特异性的结合，从而产生假阳性的结果。

2.不同的生产厂家，在新冠抗原检测试剂设计时，其选择的针对检测的新冠抗原的靶位也不尽相同，对于同一或者不同干扰物质呈现的反应也会出现不一致性，因此不同厂家试剂出现假阳性和假阴性案例和因素也不尽相同，例如某个样本在A试剂出现假阳性，用B试剂检测则是阴性，而用B试剂检测出现的假阳性样本，用A试剂来检测可能是阴性。除此之外因为个人内源性因素干扰造成的A试剂测试的假阳性，除非影响A试剂发生非特异性反应的这个因素消除了，否则用A试剂在不同时间测试，均会出现假阳性结果。因此，我们在判断试剂的优劣方面，不能简单的以某个假阳性样本来判断不同品牌试剂的质量，这是不科学的。

3.取样因素，受试者鼻腔内鼻涕较多，取样时鼻涕未擦拭干净，鼻涕中的酸性物质可能导致假阳性结果的发生。

4.操作和判读因素，标本过量滴加，如果滴加的标本超过了规定的滴数有可能导致假阳性，尤其是一些灵敏度较高的试剂，使用非配套提取液：每个厂家的试剂都有对应的特定提取液，各品牌的提取液不能混用；使用非配套采样拭子：每个品牌的抗原检测试剂都有配套的采样拭子，不要混用，拭子看上去样子差不多但是成分可能有所不同，没有经过对应试剂品牌厂家验证的拭子有可能会导致假阳性，普通棉签也不能代替配套拭子使用；开封后未及时使用，时间放置过长，特别是在高温和高湿环境下，会影响检测结果；判读超时：要仔细阅读使用说明，过早或者过晚判读都有可能导致结果判读错误。超时判读可能会导致假阳性的结果，过早判读可能会导致假阴性结果。

5.疫苗接种，接种新冠病毒灭活疫苗后，紧接着接受新冠病毒的抗原检测，可能出现假阳性。一般应尽量避免在接种疫苗的24小时内开展抗原检测。

6.新冠抗原产品在大规模应用过程中，经常会出现：少配件如少棉签，少滴头、少管子等，空袋无棉签、封口开裂、棉签断裂、被污染，裂解液管封口开裂、封口撕不开、管身开裂、漏液、液体变色、有沉淀物、滴头插不进管口、滴头堵住，检测卡封口开裂、检测条移位、破损、污染，裂解液变色或有沉淀主要运输储存不当，引发裂解液某些成分变色沉淀，出现以上情况时应停止使用，以减少异常结果的出现。

7.检测卡背景出现背景模糊，无检测线或呈现水渍、花斑、空白等异常情况，是以下情况导致：滴加裂解液过快、过多（应按照说明书要求进行操作），误将裂解液滴入检测窗口导致，检测结果通常在15分钟-30分钟读取为正确结果，放置时间过长也会出现假性结果，不能作为判读依据，应重新检测。

8.未按照试剂说明书进行相应样本的取样，而使用橙汁、可乐、醋、包括鱼类等样品进行测试，会导致假阳性。我们看到坊间有用果汁、鱼等样本检测阳性问题，应严格按照使用说明书界定的样本进行检测，使用说明书界定之外的样品检测的结果不能说明橙子或其它液体抗原检测呈“阳性”或“弱阳性”，因为抗原检测试剂盒测试对象是人体样本，如鼻拭子，鼻咽拭子，而不是橙汁等样本。

9.我们注意到，有些假性结果的出现，很多是操作层面的问题。因企业在特殊情况下无法进行必要的培训更无法触及到使用个人进行及时必要的服务跟进，企业承受了较大的压力，建议我们的企业在新冠抗原使用说明书编制时应充分和人性化的考虑受试者的这一特殊群体的特殊性，说明书应尽可能的详细生动，最好能有操作视频二维码，以更好的引导受试者正确的使用抗原检测。

10.企业在大规模供货集中在3、4月初，很多企业一个多人份的包装里只有一份说明书，分发给受试者时连说明书都没有，企业层面的操作指导提示卡说明书也没有很好的从受试者角度考量，包括3月份抗原试剂拭子也没有入盒（因为药监审批时拭子不是试剂盒的组成部分，所以原则上不能入盒），单独配置拭子分发时也出现了一定的状况。

总之：新冠抗原检测中出现的假阳性和假阴性问题，是由多种因素影响下出现的，建议在检测过程中除严格按照说明书操作使用外，对异常结果应正确分析和科学的对待，同时对异常结果应换不同批号或厂家的产品再次进行检测，从而使抗原检测真正有效的服务与抗疫工作。

作者简介

宋海波  教授 

上海市实验医学研究院副院长，全国卫生产业企业管理协会副会长、医学检验产业分会会长、实验医学分会秘书长，Wiley旗下VIEW期刊荣誉主编

先后担任：

安徽省立医院试剂部主任、副主任技师

安徽省临床检验中心副主任

安徽省微免学会第三、四届副主委

安徽省卫生厅输血质量管理委员会副秘书长

中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会副主任委员

全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会常务委员

中国医学装备协会检验医学分会学术委员会副主任委员

中国健康协会等协会常务理事

《中国体外诊断产业发展蓝皮书》主编

《复合医学杂志》、《中国基层医药杂志》、《国际检验医学杂志》等杂志常务编委

天津医科大学、吉林医药学院  客座教授

中国医疗器械政策研究与安全评价中心 特聘研究员

CACLP创始人